DIY夾心法ELISA試劑盒常見技術指南:
1、選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對。
2、ELISA試劑盒實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作。
3、標準品的配制:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據(jù)每批說明書中的細節(jié),將凍干的細胞因子復溶。
4、一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml??衫脴藴实?a data-cke-saved- >ELISA試劑盒操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內提高靈敏度。
5、為了優(yōu)化靈敏度,建議過夜孵育標準品和標本。
6、若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
7、當測定混合液體中的抗原時,如血清,建議在標本稀釋液中加不相干的Ig.Galectin 1 半乳糖凝集素1抗體
ICOS/CD278 誘導協(xié)同刺激分子CD278抗體
IL-31 白細胞介素31抗體
IL-28A/IFNL2 白細胞介素28A抗體
IL-32/NK4 白介素32抗體
IL-33/NFHEV 白介素33抗體
ILT2/CD85j 細胞表面免疫球蛋白樣轉錄因子2抗體
Integrin alpha 2/CD49b 整合素α2抗體
Integrin alpha 2b/CD41 血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體
IL-17RC/IL-17RL 白介素17受體C抗體
IGSF8 免疫球蛋超家族成員8抗體
IL-33 白介素33抗體
Importin 9 核蛋白9抗體(Ran結合蛋白M)
eIF3A 真核翻譯起始因子3A抗體
phospho-eIF4G (ser1185) 磷酸化真核翻譯起始因子4G抗體
Integrin alpha 4+Beta 7 整合素α4β7抗體
phospho-IRF3 (Ser386) 磷酸化干擾素調節(jié)因子3抗體
ISLR2 ISLR2蛋白抗體