1、蛋白質(zhì)濃度：

ELISA試劑盒蛋白質(zhì)濃度過大，鹽析時發(fā)生共沉現(xiàn)象，分離效果不好。蛋白質(zhì)濃度太稀，耗鹽量過大，蛋白質(zhì)回收率低。一般蛋白質(zhì)濃度在2.5%～3.0%較適中。

2、離子強度：

離子強度越大，蛋白質(zhì)的溶解度越低，越容易產(chǎn)生鹽析現(xiàn)象。

3、離子類型：

離子半徑小而價數(shù)高的離子，對鹽析影響較強。離子半徑大而價數(shù)低的離子，對鹽析影響較弱。

4、PH值：

ELISA試劑盒蛋白質(zhì)所帶凈電荷越多，溶解度越大。凈電荷為零時，溶解度zui低。一般將PH值調(diào)到蛋白質(zhì)等電點附近，這樣有利于鹽析。

5、溫度：

ELISA試劑盒低離子強度或水中，在一定范圍內(nèi)蛋白質(zhì)的溶解度隨著溫度的升高而增大。高鹽溶液中，蛋白質(zhì)的溶解度隨著溫度的升高有時反而下降。一般情況下在0～4℃操作。