?。ㄒ唬┘?xì)胞準(zhǔn)備
　　
　　將狀態(tài)良好的目的細(xì)胞接種到24孔板，使細(xì)胞濃度為1×105/ml細(xì)胞，接種細(xì)胞數(shù)量因細(xì)胞的生長(zhǎng)速度而略有不同，一般是保證第二天進(jìn)行病毒感染的時(shí)候細(xì)胞匯合率介于50%至70%之間。ELISA試劑盒
　　
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　　1.感染細(xì)胞*佳MOI的測(cè)定MOI（Multiplicity of Infection，感染復(fù)數(shù)）是指每個(gè)細(xì)胞感染的病毒數(shù)，通常MOI越高，病毒整合到染色體的數(shù)量以及目的蛋白的表達(dá)量越高。對(duì)于分裂活躍的細(xì)胞，比如Hela、293細(xì)胞，MOI=1～3時(shí)，80%以上的細(xì)胞均表達(dá)目的基因。而對(duì)于非分裂細(xì)胞，比如原代細(xì)胞，感染效率較低。需要進(jìn)行MOI梯度摸索實(shí)驗(yàn)，選擇適合的MOI進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
　　
　　2.感染步驟
　　
　　按實(shí)驗(yàn)需要將細(xì)胞鋪板（比如12孔板）；細(xì)胞數(shù)以第2天密度約50%為宜；37℃培養(yǎng)過(guò)夜。
　　
　　對(duì)于不適用Polybrene的細(xì)胞，以上步驟省略，直接進(jìn)入下面步驟：
　　
　　感染前，從冰箱取出并在37℃水浴中快速融化病毒，吸去細(xì)胞原有培養(yǎng)基，將病毒原液加入細(xì)胞中，輕輕8字混勻。感染后第二天（約12小時(shí)），吸去含病毒的培養(yǎng)液，換上新鮮的*培養(yǎng)液，繼續(xù)37℃培養(yǎng)。感染后48小時(shí)，對(duì)于帶GFP報(bào)告基因的病毒，可通過(guò)熒光顯微鏡觀測(cè)GFP表達(dá)效率，對(duì)于攜帶Puromycin抗性基因的病毒，換上含適當(dāng)濃度的Puromycin的新鮮*培養(yǎng)液，篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞株。
　　
　　對(duì)于Polybrene可施加的細(xì)胞：準(zhǔn)備*培養(yǎng)基和Polybrene混合物，Polybrene終濃度為摸索得到的zui適終濃度。移去培養(yǎng)基并添加0.5mlPolybrene/培養(yǎng)基混合物于每孔中（適用于24孔板，其他孔板請(qǐng)相應(yīng)調(diào)整體）。
　　
　　Phospho-HistoneH2A.X(Tyr143)磷酸化組蛋白H2AX抗體
　　
　　Phospho-HSP27(Ser254)磷酸化熱休克蛋白27抗體
　　
　　phospho-HSP70(Tyr41)磷酸化熱休克蛋白70抗體
　　
　　phospho-HSF1(Ser303)磷酸化熱休克因子1抗體
　　
　　phospho-HSF1(Ser307)磷酸化熱休克因子1抗體
　　
　　phospho-HSP70(Tyr525)磷酸化熱休克蛋白70抗體
　　
　　HACE1E3泛素蛋白連接酶HACE1抗體
　　
　　Hamartin結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體
　　
　　HNF4A肝細(xì)胞核因子4α抗體
　　
　　phospho-HNF4(Ser313)磷酸化肝細(xì)胞核因子4α抗體
　　
　　HELLS淋巴特異性解旋酶抗體
　　
　　HRASLS2HRAS樣抑制因子2抗體
　　
　　HSP40homolog熱休克蛋白家族40抗體
　　
　　RBMX糖蛋白P43抗體
　　
　　HSD3B7滋養(yǎng)層細(xì)胞抗原3β7抗體
　　
　　HSP22熱休克蛋白-22抗體
　　
　　HRH4組織胺H4受體抗體
　　
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