1．斷定抗生素效果的濃度： 不一樣的細胞株對各種抗生素有不一樣的敏感性，因而在選擇前要做預實驗，斷定抗生素對所選擇細胞的zui低效果濃度。ELISA試劑盒
① 提早 24 小時在 96 孔板或 24 孔板中接種細胞 8 孔，接種量以第二天長成 25%單層為宜，置 CO2 孵箱中 37℃培育過夜。
② 將培育液換成含抗生素的培育基， 抗生素濃度按梯度遞加0,（50, 100, 200, 400, 600, 800 和1000μ g/ml）。
③ 培育 10-14 天以絕大部分細胞濃度為準,通常為 400-800μg/ml，選擇穩(wěn) 定表達克隆時可比該濃度恰當提高一個等級維持時運用選擇濃度的一半。
2．轉染按前面的過程進行。
3．轉染 72 小時后按 1: 10 的比例將轉染細胞在 6 孔板中傳代，換為含預實驗中 斷定的抗生素濃度的選擇培育基。在6 孔板內可見單個細胞，持續(xù)培育可見單個 細胞分裂繁衍構成單個抗性集落，此刻可用兩種辦法選擇單克隆。
① 濾紙片法：用消毒的 5x5mm 濾紙片浸過胰酶，將濾紙片貼在單細胞集落上 10-15 秒，取出粘附有細胞的濾紙片放于 24 孔板中持續(xù)加壓培育。 細胞在 24 孔板中長滿后轉入 25cm2 培育瓶中，長滿后再轉入 75cm2 培育瓶中培育。
② 有限稀釋法：將細胞消化下來后做接連的 10 倍稀釋（10-2-10-10） ，將每 一稀釋度的細胞滴加到 96 孔板中培育，7- 10 天后，選擇單個克隆成長的孔再一次進行克隆。
4. ELISA或 Westernblot檢查單克隆細胞中外源蛋白的表達狀況因為不一樣克隆的 表達水平存在區(qū)別因而可一起選擇多個克隆選擇表達量zui高的克隆傳代并保種。

CACNB4    L型電壓依賴型鈣通道β4抗體
CACNA1G + CACNA1H    電壓依賴性鈣通道CACNA1G+CACNA1H抗體
CABP1    鈣結合蛋白1抗體
CAPON    神經型一氧化氮合成酶結合蛋白抗體
CHRM4    毒蕈堿型乙酰膽堿受體M4抗體
CaMK2 alpha    鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體
CACYBP    周期蛋白結合蛋白抗體
CDCA2    細胞分裂周期蛋白2抗體
CDC45L    細胞分裂周期調控蛋白45抗體
CAPH    染色體相關蛋白H抗體
CEP76    中心體蛋白質76抗體

ELISA試劑盒