elisa檢測試劑盒檢測原理
本試劑盒采用雙抗體一步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和酶標(biāo)工作液加入到預(yù)先包被人白介素1(IL-1)抗體的透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入顯色劑A、B液,顯色劑(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中人白介素1(IL-1)濃度呈正相關(guān),450nm波長下測定OD值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值,計算樣本中人白介素1(IL-1)含量。
操作步驟
1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);每孔再加入酶標(biāo)工作液100μL;空白對照孔不加。
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。
6、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min。
7、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
8、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
9、計算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。zui終濃度為實(shí)際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
elisa檢測試劑盒Human insulin autoantibodies,IAA ELISA試劑盒 人胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
human Insulin receptor substrate 2,IRS-2 ELISA試劑盒 人胰島素受體底物2(IRS-2)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Insulin Receptor β,ISR-β ELISA試劑盒 人胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Insulin,INS ELISA試劑盒 人胰島素(INS)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human insulin-like growth factors 1,IGF-1 ELISA試劑盒 人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human insulin-like growth factors 2,IGF-2 ELISA試劑盒 人胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human insulin-like growth factors binding protein 1,IGFBP-1 ELISA試劑盒 人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human insulin-like growth factors binding protein 2,IGFBP-2 ELISA試劑盒 人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human insulin-like growth factors binding protein 3,IGFBP-3 ELISA試劑盒 人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human insulin-like growth factors binding protein 4,IGFBP-4 ELISA試劑盒 人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human intact Parathormone ,i-PTH ELISA試劑盒 人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48Telisa檢測試劑盒