elisa酶聯(lián)免疫試劑盒樣本的處理方法
不同類(lèi)型的樣本的處理方法 點(diǎn)擊次數(shù)：66 發(fā)布時(shí)間：2017/9/30
通常我們可用于大鼠elisa檢測(cè)試劑盒檢測(cè)的樣本是有多種類(lèi)型的，如血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等，不同類(lèi)型的檢測(cè)樣本前期的處理方法是不一樣的。正確的處理樣本是保證ELISA檢測(cè)的正確性和準(zhǔn)確性的*步。
1,血清
血清是zui常用于ELISA檢測(cè)的一類(lèi)樣本，處理也比較簡(jiǎn)單。
用無(wú)熱原、無(wú)內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本，將試管或離心管室溫放置2小時(shí)或4℃一個(gè)晚上，使血清析出。（將試管或離心管傾斜放置，使液面橫截面增大，能使血清更大程度的析出。）4℃ 1000×g離心20分鐘，仔細(xì)收集上清。建議將血清分裝多份，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。
采血過(guò)程中應(yīng)避免溶血，因?yàn)榧t細(xì)胞裂解時(shí)會(huì)釋放具有過(guò)氧化酶活性的物質(zhì)，在以HRP為標(biāo)記的ELISA檢測(cè)中會(huì)有非特異性的顯色，而導(dǎo)致檢測(cè)的不準(zhǔn)確性。同時(shí)也應(yīng)避免細(xì)菌污染，因?yàn)榫w內(nèi)可能含有內(nèi)源性的HRP從而導(dǎo)致檢測(cè)的假陽(yáng)性。
2、血漿
    ELISA試劑盒用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標(biāo)本，標(biāo)本采集后30min內(nèi)4℃ 1000×g離心15min，取上清即血漿。將上清分裝多份，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。    常用的抗凝劑為EDTA、肝素鈉和枸櫞酸鈉等，檢測(cè)時(shí)還應(yīng)仔細(xì)閱讀試劑盒說(shuō)明書(shū)，檢查試劑盒是否對(duì)抗凝劑有特殊要求。
3、  細(xì)胞培養(yǎng)上清
    取細(xì)胞培養(yǎng)上清到離心管，1000×g離心20min，除去細(xì)胞碎片及雜質(zhì)，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。
4、  細(xì)胞裂解液
1）  吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基，用胰酶消化細(xì)胞，加適量培養(yǎng)基將細(xì)胞從培養(yǎng)板上吹下來(lái)。懸浮細(xì)胞可省略。
2）  收集細(xì)胞懸液，1000×g離心10min，棄去培養(yǎng)基，用預(yù)冷的PBS潤(rùn)洗3次。
3）  加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）重懸細(xì)胞。通常6孔板一個(gè)孔的細(xì)胞量需要150~250μL PBS重懸。
4）  將樣品放入-20℃或-80℃，使樣品冷凍，再放室溫解凍樣品，反復(fù)凍融幾次，使細(xì)胞充分裂解。也可將樣品進(jìn)行超聲破碎，以達(dá)到裂解的目的。
5）  4℃ 10000×g 離心10min，除去細(xì)胞碎片，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。
5、組織勻漿液
1）  將組織樣本用PBS (0.01 [錨點(diǎn)] [錨點(diǎn)] M, PH 7.4) 沖洗，洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。
2）  將組織塊稱重，記錄后剪碎，碎塊應(yīng)盡量小，便于勻漿得更充分
3）  將組織按一定的比例加入預(yù)冷的PBS（臨用前加入蛋白酶抑制劑）勻漿，勻漿時(shí)置于冰上或冰浴中。（通常按組織重量：PBS體積=1:9的比例勻漿，例如1g的組織樣本對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，檢測(cè)后計(jì)算樣品濃度時(shí)應(yīng)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)）
4）  吸取勻漿液到離心管，4℃ 5000×g 離心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。
6、  尿液、唾液等其他液體生物樣本
1000×g離心20min，取上清即可檢測(cè)。
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒人抗血小板抗體IgM(PA-IgM)ELISA Kit    名稱：    Human plaet antibodies IgM,PA-IgM ELISA Kit
人抗血小板抗體IgG(PA-IgG)ELISA Kit    名稱：    Human plaet antibodies IgG(PA-IgG)ELISA Kit
人抗血小板抗體IgA(PA-IgA)ELISA Kit    名稱：    Human plaet antibodies IgA,PA-IgA ELISA Kit
人抗血小板抗體(anti-PA Ab)ELISA Kit(半定量)    名稱：    Human anti-PA Ab ELISA Kit(Semi-quantitative)
人抗血小板抗體(anti-PA Ab)ELISA Kit    名稱：    Human anti-plaet antibody,anti-PA Ab ELISA Kit
人抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)ELISA Kit    名稱：    Human anti-thymocyte globulin,ATG ELISA Kit
人抗信號(hào)識(shí)別顆粒54kDa蛋白(SRP54)抗體ELISA Kit    名稱：    Human anti signal recognition particle 54 kDa protein(SRP54)antibody ELISA kit
人抗心肌β1受體(MB1R)自身抗體ELISA Kit    名稱：    Human myocardial β1 receptor (MB1R) autoantibody ELISA kit
人抗小鼠抗體(HAMA)ELISA Kit    名稱：    Human anti-mouse antibody,HAMA ELISA kit
人抗小腦(CE)自身抗體ELISA Kit    名稱：    Human anti cerebellum (CE) autoantibody ELISA kit
人抗小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)抗體ELISA Kit    名稱：    Human small nuclear ribonucleoprotein(snRNP/Sm)antibody ELISA kit
人抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)ELISA Kit    名稱：    Human anti-mitochondrial antibody M2 subtype,AMA-M2 ELISA kit
人抗線粒體抗體(AMA)ELISA Kit    名稱：    Human Anti-mitochondria autoantibodies,AMA ELISA Kit
人抗紋狀體(ST)自身抗體ELISA Kit    名稱：    Human anti striatum(ST)autoantibody ELISA kit
人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA Kit    名稱：    Human anti-gastric parietal cell antibody,AGPA/PCA ELISA Kit
人抗尾狀核(CN)自身抗體ELISA Kit    名稱：    Human anti caudate nucleus(CN)autoantibody ELISA kit
人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)ELISA Kit    名稱：    Human anti-Reticulin antibody,ARA ELISA Kit
人抗外切酶體復(fù)合物成分RRP45(EXOSC9)抗體ELISA Kit    名稱：    Human anti exosome complex component RRP45(EXOSC9)antibody ELISA kit
人抗外切酶體成分10(EXOSC10)抗體ELISA Kit    名稱：    Human anti exosome component 10(EXOSC10)antibody ELISA kit
人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(anti-MCV Ab)ELISA Kit    名稱：    Human anti-MCV Ab ELISA Kit
人抗肽?；彼崦搧嗕@酶4型(PADI4)抗體 ELISA Kit    名稱：    Human Protein-arginine deiminase type-4(PADI4)antibody ELISA Kit
人抗髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白抗體(IgG)ELISA Kit    名稱：    Human myelin oligodendrocyte glycoprotein antibody IgG ELISA Kit
人抗髓磷脂相關(guān)糖蛋白(MAG)抗體ELISA Kit    名稱：    Human anti myelin-associated glycoprotein(MAG)antibody ELISA kit
人抗髓磷脂抗體IgA(anti-myelin Ab)ELISA Kit    名稱：    Human anti-myelin antibody IgA ELISA Kit
人抗雙載蛋白(AMPH)抗體ELISA Kit    名稱：    Human anti amphiphysin(AMPH)antibody ELISA kit
人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)IgGELISA Kit    名稱：    Human anti-double stranded DNA,dsDNA IgG ELISA KIT
人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA(dsDNA)抗體(IgM)ELISA Kit    名稱：    Human anti-double stranded DNA(dsDNA)antibody(IgM)ELISA Kit
人抗生長(zhǎng)激素(GH)抗體ELISA Kit    名稱：    Human anti-growth hormone(GH)antibody ELISA Kit
人抗腎小球基底膜(GBM)抗體ELISA Kit    名稱：    Human glomerular basement membrane(GBM)antibody ELISA kit
人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)ELISA Kit    名稱：    Human Anti-adrenocortical antibody,AAA ELISA Kit
人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)ELISA Kit    名稱：    Human neuronal nuclear autoantibody,ANNA-2/Ri ELISA Kit
人抗神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)自身抗體ELISA Kit    名稱：    Human GFAP autoantibody ELISA Kit
人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)ELISA Kit    名稱：    Human anti-parotid duct antibody ELISA Kit
人抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)ELISA Kit    名稱：    Human anti-cartilage-antibody ELISA Kit
人抗?fàn)盍霾《?7型(HPV17)抗體(IgG)ELISA Kit    名稱：    Human anti-papillomavirus type 17(HPV17)antibody(IgG)ELISA Kitelisa酶聯(lián)免疫試劑盒