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elisa檢測試劑盒主要的操作要點(diǎn)
點(diǎn)擊次數(shù):474 更新時(shí)間:2018-01-03

elisa檢測試劑盒主要的操作要點(diǎn)
1.試劑的準(zhǔn)備
按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。
 2.標(biāo)本的采取和保存
可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液、分泌物和排泄物)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑
3.保溫
在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在ELISA中似不恰當(dāng)。
ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì),只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過程,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。
elisa檢測試劑盒干擾素α/β受體2(IFNα/βR2)ELISA試劑盒    ,英文名:    IFNα/βR2 ELISA Kit
干擾素α/β受體(IFNα/βR1)ELISA試劑盒    ,英文名:    IFNα/βR1 ELISA Kit
干擾素α(IFNα)ELISA試劑盒    ,英文名:    IFNα ELISA Kit
肝脂酶(LIPC)ELISA試劑盒    ,英文名:    LIPC ELISA Kit
肝臟磷酸果糖激酶(PFKL)ELISA試劑盒    ,英文名:    PFKL ELISA Kit
肝型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP1)ELISA試劑盒    ,英文名:    FABP1 ELISA Kit
肝細(xì)胞生長因子受體(HGFR)ELISA試劑盒    ,英文名:    HGFR ELISA Kit
肝細(xì)胞癌相關(guān)蛋白1(HCRP1)ELISA試劑盒    ,英文名:    HCRP1 ELISA Kit
肝素酶2(HPA2)ELISA試劑盒    ,英文名:    HPA2 ELISA Kit
肝素酶(HPA)ELISA試劑盒    ,英文名:    HPA ELISA Kit
肝素結(jié)合性表皮生長因子(HBEGF)ELISA試劑盒    ,英文名:    HBEGF ELISA Kit
肝受體同源物1(LRH1)ELISA試劑盒    ,英文名:    LRH1 ELISA Kit
肝腎骨堿性磷酸酶(ALPL)ELISA試劑盒    ,英文名:    ALPL ELISA Kit
肝配蛋白B3(EFNB3)ELISA試劑盒    ,英文名:    EFNB3 ELISA Kit
肝配蛋白B2(EFNB2)ELISA試劑盒    ,英文名:    EFNB2 ELISA Kit
肝配蛋白B1(EFNB1)ELISA試劑盒    ,英文名:    EFNB1 ELISA Kit
肝配蛋白A受體3(EPHA3)ELISA試劑盒    ,英文名:    EPHA3 ELISA Kit
肝配蛋白A受體10(EPHA10)ELISA試劑盒    ,英文名:    EPHA10 ELISA Kit
肝配蛋白A受體1(EPHA1)ELISA試劑盒    ,英文名:    EPHA1 ELISA Kit
肝配蛋白A5(EFNA5)ELISA試劑盒    ,英文名:    EFNA5 ELISA Kit
肝配蛋白A4(EFNA4)ELISA試劑盒    ,英文名:    EFNA4 ELISA Kit
肝配蛋白A3(EFNA3)ELISA試劑盒    ,英文名:    EFNA3 ELISA Kit
肝配蛋白A2(EFNA2)ELISA試劑盒    ,英文名:    EFNA2 ELISA Kit
肝配蛋白A1(EFNA1)ELISA試劑盒    ,英文名:    EFNA1 ELISA Kit
肝膠原凝集素1(CLL1)ELISA試劑盒    ,英文名:    CLL1 ELISA Kit
肝腸鈣黏蛋白(CDH17)ELISA試劑盒    ,英文名:    CDH17 ELISA Kit
肝癌源性生長因子(HDGF)ELISA試劑盒    ,英文名:    HDGF ELISA Kit
甘油酸激酶(GLYCTK)ELISA試劑盒    ,英文名:    GLYCTK ELISA Kit
甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)ELISA試劑盒    ,英文名:    GAPDH ELISA Kit
甘油磷酸肌醇錨定高密度脂蛋白結(jié)合蛋白1(GPIHBP1)ELISA試劑盒    ,英文名:    GPIHBP1 ELISA Kit
甘油磷酸二酯磷酸二酯酶1(GDE1)ELISA試劑盒    ,英文名:    GDE1 ELISA Kit
甘油磷酸膽堿磷酸二酯酶(GPCPD1)ELISA試劑盒    ,英文名:    GPCPD1 ELISA Kit
甘油磷酸-O-?;D(zhuǎn)移酶(GNPAT)ELISA試劑盒    ,英文名:    GNPAT ELISA Kit
甘油激酶5(GK5)ELISA試劑盒    ,英文名:    GK5 ELISA Kit
甘油激酶2(GK2)ELISA試劑盒    ,英文名:    GK2 ELISA Kit
甘油激酶(GK)ELISA試劑盒    ,英文名:    GK ELISA Kit
甘露糖受體C2(MRC2)ELISA試劑盒    ,英文名:    MRC2 ELISA Kit
甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)ELISA試劑盒    ,英文名:    MRC1 ELISA Kit
甘露糖受體C1(MRC1)ELISA試劑盒    ,英文名:    MRC1 ELISA Kit
甘露糖磷酸異構(gòu)酶(MPI)ELISA試劑盒    ,英文名:    MPI ELISA Kit
甘露糖結(jié)合凝集素2(LMAN2)ELISA試劑盒    ,英文名:    LMAN2 ELISA Kitelisa檢測試劑盒

 

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