在操作ELISA試劑盒實驗的時候加完顯色液(顯色一定時間后，再加終止液后，立即測試其吸光度值，等過幾分鐘再測試吸光度值，發(fā)現(xiàn)兩次測得的吸光度值發(fā)生衰減。第二次均小于次。并且，加終止液時，從1加到第12條后，測試發(fā)現(xiàn)，吸光度值從1-12條逐級衰減。

有可能是顯色液的質量不夠好。一般情況下，終止反應后OD值的下降前期不是很明顯。終止后，吸光度值是會隨著時間衰減，所以一般是加完終止液后立即測，這樣比較準。

再次分析12條顯示逐級遞減的原因看看是否是：

① 顯色時間調整，如果您現(xiàn)在的顯色時間是10MIN，那調整到30MIN，再加終止液,觀察上述現(xiàn)象是否出現(xiàn)。

② 終止液中加入少量甘油看下怎么樣。

ELISA試劑盒顯色時間是30分鐘，終止后要求在30分鐘內檢測，加入終止液后，在加入終止液后2到3分終內檢測，這是OD值相對比較高。擬合值能達到四個9。