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elisa測定試劑盒實(shí)驗(yàn)原理與特點(diǎn)
點(diǎn)擊次數(shù):682 更新時(shí)間:2020-11-18

elisa測定試劑盒試驗(yàn)原理:

elisa測定試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。

elisa測定試劑盒操作步驟:

1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)

2.加樣:分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,

3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔elisa測定試劑盒加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同 3。

8.洗滌:操作同 5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.

10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

elisa測定試劑盒產(chǎn)品及特點(diǎn):

1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增巴戟天,與其他植物沒有交叉反應(yīng)。

3. 提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

聯(lián)系人:王經(jīng)理
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電話:
86-021-57763112
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