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elisa測(cè)定試劑盒原理與組成結(jié)構(gòu)的幾點(diǎn)
點(diǎn)擊次數(shù):602 更新時(shí)間:2021-01-08

elisa測(cè)定試劑盒使用原理:

elisa測(cè)定試劑盒技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何的診斷試劑離不開(kāi)的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過(guò)各種化學(xué)合成方法制備。近年來(lái),隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑,各種新型使用的測(cè)定方法也不斷出現(xiàn)。

elisa測(cè)定試劑盒組成結(jié)構(gòu):

一、血清:操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱量和肉毒素的試管。收集血液后,1000*g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心的分離。

二、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

三、細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

四、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

五、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

elisa測(cè)定試劑盒試劑盒成分: 

一、預(yù)包被板: 抗小鼠Elisa試劑盒-6兔子IgG,親合純化 96T

二、 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1

三、標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2 

四、 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1

五、 標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1

六、顯色劑: TMB底物液 15mL x 1

七、終止液: 1N硫酸 12mL x 1

八、濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說(shuō)明 1實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒(méi)有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)

聯(lián)系人:王經(jīng)理
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