細(xì)菌總蛋白和膜蛋

    在這項(xiàng)研究中，研究人員采用了一種具有疏蛋白（protein-repellent）性的柔性聚合物，并以一種可結(jié)合蛋白材料作為聚合物的盒狀支撐點(diǎn)，通過激光直刻法（Direct  Laser  Writing  Method）制作出一種特殊的聚合物支架。這種支架的疏蛋白結(jié)構(gòu)由25微米高的支柱組成，各個(gè)支柱之間通過細(xì)棒連接，連接點(diǎn)高度不一，然后盒狀支撐點(diǎn)被地放在細(xì)棒中間。當(dāng)含有粘附蛋白的溶液浸入支架時(shí)，蛋白只會(huì)與盒狀支撐點(diǎn)相結(jié)合，兩小時(shí)內(nèi)，個(gè)體細(xì)胞占滿支架，且只粘附在特定位點(diǎn)。由此，通過改變支撐點(diǎn)和細(xì)棒的位置，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞形狀的三維控制

6、DAB：

6.1 ZLI-9032/9033 DAB Kit：
使用前只需將試劑盒提供的A、B、C三種試劑各一滴加至1ml雙蒸水中，即可獲得1ml DAB工作液，簡(jiǎn)單易用。

6.1 ZLI-9030 DAB：
6mgDAB溶于10mlTBS（0.05M  pH7.6），再加入0.1ml濃度為3％的H2O2，過濾掉沉淀物，即可。

7、AEC：
4mg AEC溶于1ml二甲基甲酰胺中，加入14ml濃度為0.1M的醋酸緩沖液（pH5.2），然后加入0.15ml 3%H2O2，過濾掉沉淀物。

8、RIPA：
1×PBS，1%NP 40，0.5 sodium deoxycholate，0.1% SDS（此液體可長(zhǎng)期保存）。以下抑制劑以儲(chǔ)存液方式保存，臨用前加入RIPA中。

8.1 10mg/ml PMSF異丙醇溶液（用量為10 l/ml）

8.2 Aprotinin（Sigma產(chǎn)品，用量為30 l/ml）

8.3 1000mM sodium orthovanadate冷凍液
（用量為10 l/ml）

9、Blotto A：
常規(guī)使用1×PBS，5% milk，0.05% Tween 20。

10、Blotto B：
與Phosphotyrosine抗體共用，1×PBS，1% milk，0.05% Tween 20。部分實(shí)驗(yàn)中milk可*去除，但可能引起背景增高。