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產(chǎn)品展示
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藍(lán)舌病病毒8型RT-LAMP試劑盒
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產(chǎn)品型號:
50T
產(chǎn)品報價:
產(chǎn)品特點:
藍(lán)舌病病毒8型RT-LAMP試劑盒建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
  50T藍(lán)舌病病毒8型RT-LAMP試劑盒的詳細(xì)資料:

它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增鮑皰疹樣病毒,與其他植物沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

藍(lán)舌病病毒8型RT-LAMP試劑盒

RT-LAMP kit for bluetongue virus type 8

BJ-P987572

?
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

5g白僵菌Human CNTN4(Contactin 4) ELISA Kit

1g地衣芽孢桿菌Human CK-18/KRT18(CytokeRatin 18) ELISA Kit

5g阿舒假囊酵母Human CK-20/KRT20(CytokeRatin 20) ELISA Kit

1g米曲霉Human CYP2A6(Cytochrome P450 2A6) ELISA Kit

5g泡盛曲霉變種Human CYPA(Cyclophilin A) ELISA Kit

1g植物乳桿菌Human CYPB(Cyclophilin B) ELISA Kit

5g核盤菌Human CYSLTR2(Cysteinyl Leukotriene Receptor 2) ELISA Kit

25g溶血不動桿菌Human DGAT1(Diacylglycerol O-acyltransferase 1) ELISA Kit

5g短穩(wěn)桿菌Human D2R/DRD2(Dopamine Receptor D2) ELISA Kit

1g異常漢遜酵母Human DAG1(Dystrophin Associated Glycoprotein 1) ELISA Kit

250mg枯草芽孢桿菌Human DAT(Dopamine Transporter) ELISA Kit

10g黑根霉Human CKLF(Chemokine Like Factor) ELISA Kit

250g釀酒酵母Human DAP6(Death Associated Protein 6) ELISA Kit

50g米根霉Human CKLFSF6(Chemokine Like Factor Superfamily 6) ELISA Kit

100g枯草芽孢桿菌枯草亞種Human CKMT1A(Creatine Kinase, Mitochondrial 1A) ELISA Kit

25g美澳型核果褐腐病菌Human CLDN11(Claudin 11) ELISA Kit

10g亞拉巴馬全緣孔菌Human CLDN1(Claudin 1) ELISA Kit

藍(lán)舌病病毒8型RT-LAMP試劑盒Apaf-1(NT)  凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端)左旋肉堿8-溴喹啉histone H3-like protein  組蛋白H3樣蛋白(N端多肽)

Activated protein C  活化蛋白C抗體矢車菊素-3-0-葡糖糖苷8-溴喹啉HIV-1(human immunodeficiency virus type 1)  艾滋病病毒-1/人類免疫缺陷病毒1型(抗原)

Apelin  脂肪炎癥因子Apelin抗體氯化矢車菊素焦磷酸銅四水合物HIV-1(human immunodeficiency virus type 1)  艾滋病病毒-1/人類免疫缺陷病毒1型(抗原)

Apelin receptor  Apelin receptor抗體5-羥色胺酸(5-HTP)溴鄰苯三酚紅Measles virus protein(Plant2 derived measles virus hemagglutinin protein)  麻疹病毒紅血球凝集素蛋白多肽

APC/Adenomatous Polyposis Coli  腺瘤樣息肉抗體亥茅酚苷溴鄰苯三酚紅Measles virus protein(Plant2 derived measles virus hemagglutinin protein)  麻疹病毒紅血球凝集素蛋白多肽

APEX1  多功能DNA修復(fù)酶抗體異鼠李素-3-O-新橙皮苷LinezolidHMGB1 (High Mobility Group Box protein 1)  高遷移率族蛋白-1(抗原)

ATH III  凝血酶Ⅲ抗體紫蓳靈; 紫堇靈堿唑來磷酸一水化合物HSL(hormone-sensitive lipase)  荷爾蒙敏感脂肪酸(抗原)

APG4B/AUTL1  細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白4B抗體高麗槐素; 馬卡因唑來磷酸一水化合物HSP-27(Heat Shock Protein 27)  熱休克蛋白-27(抗原)

操作步驟:
1:樣品準(zhǔn)備:取1毫升細(xì)胞培養(yǎng)上清(貼壁和懸浮細(xì)胞都可以 已培養(yǎng)48小時以上),在16000g離心5分鐘,小心棄去上清,避免丟失沉淀(沉淀量有可能很少,目視看不到)。將沉淀用無菌PBS重懸,在16000g離心5分鐘,同樣小心棄去上清,如此反復(fù)用無菌PBS洗三次 將獲得的沉淀用100微升超純水重懸,置于100℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存1到2個月。
2:PCR反應(yīng)的準(zhǔn)備:
待各組份融化后先瞬時離心,然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應(yīng)體系,每次實驗需加一個陰性和一個陽性對照,測試反應(yīng)管可以有多個。配制過程中應(yīng)注意無菌,并注意避免操作產(chǎn)生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染,推薦在有風(fēng)壓的設(shè)備如超凈臺或生物安全柜中進(jìn)行操作。建議配制完畢后瞬時離心以使液體沉至管底。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 藍(lán)舌病病毒8型 LAMP試劑盒
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