中文名稱：磷脂鐵蘇木素(FeH)染色液

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：3×100ml

產(chǎn)品貨號：BJ-01X6891

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

細(xì)胞培養(yǎng)方法：

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

Treponema hyodysenteriae豬痢疾密螺旋體LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Rabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1mlHIP2  泛素蛋白連接E2抗體 規(guī)格: 0.2ml

蛇源性成分PCR檢測試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周RASSF8  RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2mlCD133 antigen  造干細(xì)胞抗原CD133抗體 規(guī)格: 0.1ml

Fructus sophorae槐角PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周C1orf177  1號染色體開放閱讀框177抗體 規(guī)格: 0.2mlPUS10/CCDC139  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白139抗體 規(guī)格: 0.2ml

Enterococcus faecium 屎腸球LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周GPSM1  G蛋白信號調(diào)節(jié)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit anti-MG IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的兔抗爪沙鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

Afipia spp.阿菲波屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周phospho-MAP4K4(Ser629)  磷酸化絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-ATF2(Thr69/71)  磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Semen pruni郁李仁LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周OCT1  陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)器1抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-B-Raf (Thr401)  磷酸化B-Raf抗體 規(guī)格: 0.1ml

虎源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周DBF4A  S期激活化蛋白DBF4A抗體 規(guī)格: 0.2mlMPP1/EMP55  紅細(xì)胞膜蛋白55抗體 規(guī)格: 0.2ml

Proteus vulgaris普通變形桿探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周CD23/Fc EpsilonR II  CD23抗體 規(guī)格: 0.2mlGRM1  促代謝型谷受體1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Moroccan Watermelon Mosaic Virus(MWMV)摩洛哥西瓜花葉病毒RT-PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Bio  標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2  規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-horse IgM/PE  PE標(biāo)記的兔抗馬IgM 規(guī)格: 0.1ml

Semen trichosanthis瓜蔞子PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周TSARG6/DNAJB13  生細(xì)胞凋亡相關(guān)基因6抗體 規(guī)格: 0.1mlMAFbx/Fbx32  泛素蛋白連接抗體 規(guī)格: 0.2ml

磷脂鐵蘇木素(FeH)染色液Fraser培養(yǎng)基 英文名稱：Fraser Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g

人脯肽(PEPD)免疫試劑盒*直銷

M1培養(yǎng)基 英文名稱：M1 Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g

人α甘肽S轉(zhuǎn)移(α-GST)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

豬生長激素(GH)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

犬免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

小鼠糖蛋白130(gp130)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

馬腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒*直銷

小鼠促有絲分裂因子(MF/MPF)免疫試劑盒*直銷

大鼠乙酰輔A羧化合成(ACC)免疫試劑盒*直銷

兔子抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ Ab)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)