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H4-II-E-C3(大鼠肝癌細胞 )說明書
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產(chǎn)品報價:
產(chǎn)品特點:
H4-II-E-C3(大鼠肝癌細胞 )說明書在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,例如是否有雜細胞或者支原體等。
  H4-II-E-C3(大鼠肝癌細胞 )說明書的詳細資料:

凍存的步驟:
1. 冷凍前一日前更換半量或全量培養(yǎng)基,觀察細胞生長情形。
2. 使用ScienCell凍存液 混合均勻,置于室溫下待用。
3. 依細胞傳代培養(yǎng)的操作,收集培養(yǎng)好的細胞,取少量細胞懸浮液(約0.1 ml) 計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。
4. 離心,去除上清液,加入適量冷凍保存溶液,使細胞濃度為1-5 x 10^6 cells/ml,混合均勻,
分裝于已標示*之冷凍保存管中,1 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。
5. 冷凍保存方法1: 冷凍管置于4 度10 分鐘→ -20 度 30 分鐘→ -80 度16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 長期儲存。
6. 冷凍保存方法2: 冷凍管置于已設定程序之等速降溫機中,再放入液氮槽中。程序為: program 7: HB CELL 。

本公司代理ATCC細胞,提供售前售后一條龍服務,若要獲取詳細的說明書或價格信息,請咨詢在線客服。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

規(guī)格

H4-II-E-C3(大鼠肝癌細胞 )說明書

H4-II-E-C3 (rat hepatoma cells)

5×106cells

產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
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細胞培養(yǎng)技巧:
一、凍存時的注意事項:
1. 在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %
2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,例如是否有雜細胞或者支原體等。
3. 使用的DMSO 應為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級,以高壓蒸汽
滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。
4. 冷凍保存的細胞濃度:
4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml
4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。
4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。
4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。
5. 冷凍保護劑濃度為5 %或10 % DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應作一個backup culture,以防止冷凍失敗。 
培養(yǎng)操作步驟
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時; 
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

刺甘草查爾 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 人富組蛋白(HTN-3)ELISA試劑盒人96T12.5-800 ng/mL小鼠腓骨蛋白7(FBLN7)ELISA試劑盒,英文名:FBLN7 ELISA Kit

洛索洛芬鈉 質量規(guī)格:≥98.5%(按照干品計算) Loxoprofen sodium CLED培養(yǎng)基/溴百里酚藍糖胱氨瓊脂/CLED Medium/BROLACIN Agar/Bromothymol-blue Lactose Cystine Agar/Cystine-Lactose-Electrolyte Deficient Agar尿液中微生物的選擇性分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口

10-羥基癸  英文名稱:10- hydroxy decanoic acid   保存:-20℃   規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 血管生成素受體1抗體

奧司他韋(標準品) 質量規(guī)格:>98%,標準品 Oseltamivir phosphate  107kDa肌多聚-4-酶Ⅰ型(INPP4A)重組蛋白英文名稱:Recombinant Inositol Polyphosphate-4-Phosphatase Type I 107kDa (INPP4A)

唐古特大黃 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.6g 人轉鐵蛋白(TF)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL大鼠骨形成蛋白1(BMP1)ELISA試劑盒,英文名:BMP1 ELISA Kit

環(huán)司胺; 環(huán)胺 質量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于細胞培養(yǎng) Ciclopirox Olamine Caov-3(人突狀卵巢腺細胞)5×106cells/瓶×2

黃芩素 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial 人鐵調素調節(jié)蛋白(Hemojuvelin)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠多巴胺受體D3(DRD3)ELISA試劑盒,英文名:DRD3 ELISA Kit

黃連(三角葉黃連) 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.5g DNA基轉移酶3L抗體 SEPHS2 ELISA Kit 硒合成酶2(SEPHS2)ELISA試劑盒

沒食子酯 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg ELISA Kit for Human Actin, aortic smooth muscle小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒,英文名:MPO-ANCA IgG ELISA Kit

阿魏鈉  英文名稱:Sodium ferulate   保存:-20℃   規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 尿路上皮特異蛋白3抗體

苑子苷A 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,10mg/支 人增殖相關蛋白2G4(PA2G4)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠白三E4(LTE4)ELISA試劑盒,英文名:LTE4 ELISA Kit

紅參 訂購|咨詢 規(guī)格: 1g 眼睛和頭發(fā)顏色相關蛋白FUZ抗體 LFA3 ELISA Kit 淋巴細胞功能關聯(lián)抗原3(LFA3)ELISA試劑盒

β-欖香 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1ml 肌側索硬化癥相關蛋白FIG4抗體 PA ELISA Kit 脂(PA)ELISA試劑盒

H4-II-E-C3(大鼠肝癌細胞 )說明書phospho-M-CSF Receptor(Tyr546)  磷酸化巨噬細胞集落刺激因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

PPIB/Cyclophilin B  親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIB抗體 規(guī)格: 0.2ml

Sclerostin  骨形態(tài)發(fā)生抑制蛋白SOST抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

Cadherin 8  鈣粘附蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-SHC (Tyr317)  磷酸化SH2結構域轉化蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

SLC39A7  轉運蛋白家族39成員7抗體 規(guī)格: 0.2ml

Mouse IgA  兔抗小鼠IgA抗體 規(guī)格: 0.2ml

TRPM8  “冷”蛋白TRPM8抗體 規(guī)格: 0.2mlCTGFL  結締組織生因子樣蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

PNMT  苯乙醇胺甲基轉移酶抗體 規(guī)格: 0.2mlSIRT7  沉默調節(jié)樣蛋白SirT7抗體 規(guī)格: 0.2ml

FRMD6  FRMD6蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlHNF4/TCF4/HNF4A  肝細胞核因子4α抗體 規(guī)格: 0.1ml

LATS2  瘤抑制基因LATS2抗體 規(guī)格: 0.2mlMouse Anti-human IgM/Gold  膠體金標記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 2ml

Rabbit Anti-dog IgG/PE  PE標記的兔抗狗IgG 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-pig IgG/Cy5.5  Cy5.5標記的兔抗豬IgG 規(guī)格: 0.1ml

Calmodulin/CaM I  鈣調節(jié)素抗體(鈣調蛋白/鈣調素) 規(guī)格: 0.1mlphospho-SIRT6(Ser338)  磷酸化沉默調節(jié)相關蛋白6抗體 規(guī)格: 0.1ml

 

產(chǎn)品相關關鍵字: H4-II-E-C3 大鼠肝癌細胞 5×106cells
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