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草魚呼腸孤病毒3型RT-LAMP試劑盒
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產品型號:
50T
產品報價:
產品特點:
草魚呼腸孤病毒3型RT-LAMP試劑盒建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,應盡量避免反復凍融,否則會導致模板的降解,影響PCR效率。
  50T草魚呼腸孤病毒3型RT-LAMP試劑盒的詳細資料:

服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據分析——結果交付——售后服務。

產品名稱

英文名稱

貨號

草魚呼腸孤病毒3型RT-LAMP試劑盒

RT-LAMP kit for grass carp reovirus type 3

BJ-P987961

它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增鮑皰疹樣病毒,與其他植物沒有交叉反應。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
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使用及效果:
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

100mg大腸埃希氏桿菌Anti-CCR4 Antibody

500mgPaenibacillusAnti-CCR4 Antibody

1g白色念珠菌Anti-CCR4 Antibody

25g乳酸乳球菌乳亞種Anti-CCR5 Antibody

5g黑色小單孢菌Anti-CCR4 Antibody

100g球孢白僵菌Anti-CCR5 Antibody

25g寄生曲霉Anti-CCR9 Antibody

1g厚粉紅隔孢伏革菌Anti-CCR5 Antibody

5g根瘤菌Anti-CCR5 Antibody

25g香菇Anti-CCR6 Antibody

5g猴假單胞菌Anti-CCS Antibody

1g莖腐頭孢霉Anti-CCT3 Antibody(原貨號PB0972)

5g大腸埃希氏菌Anti-CCT2 Antibody

100g柔嫩艾美耳球蟲Anti-CCT5 Antibody

500g葡萄座腔菌Anti-CCT4 Antibody(原貨號PB1015)

1g金黃色葡萄球菌金黃亞種Anti-CCT7 Antibody

25g美澳型核果褐腐病菌Anti-CD11c/Itgax Antibody

草魚呼腸孤病毒3型RT-LAMP試劑盒 Alpha-ACTN4/FITC  熒光素標記抗α-輔肌動蛋白4抗體IgG心肌錨蛋白重復結構域1抗體3-羧基苯酸頻哪酯Mouse MMP-7 (Matrix Metalloproteinase 7) ELISA Kit

ADAM-TS1/FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型抗體IgG抑制蛋白結構域蛋白1抗體3-乙氧羰基苯酸頻哪酯Mouse MMP-8 (Matrix Metalloproteinase 8) ELISA Kit

ADAM10/MADM/CD156c/FITC  熒光素標記去整合素樣金屬蛋白酶10抗體IgG抑制蛋白結構域蛋白2抗體3-乙氧羰基苯酸頻哪酯Mouse FFA (Free Fatty Acid) ELISA Kit

ADAM-TS7/FITC  熒光素標記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體IgG抑制蛋白結構域蛋白3抗體4-吡唑酸頻哪酯Mouse MT (Melatonin) ELISA Kit

14-3-3 family protein/FITC  熒光素標記植物14-3-3蛋白抗體IgG抑制蛋白結構域蛋白4抗體4-吡唑酸頻哪酯Mouse mIgA (membrane IgA) ELISA Kit

ADAM-TS7/FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7(N端)抗體IgG雌二抗體對苯乙烯磺酸水合物Mouse MHB (Methemoglobin) ELISA Kit

ADAM-TS12/FITC  熒光素標記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12抗體IgG淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體對苯乙烯磺酸水合物Mouse Methylase ELISA Kit  

ACV-A/FITC  熒光素標記活化素A抗體IgG淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體對苯乙烯磺酸水合物Mouse MAU (Microalbuminuria) ELISA Kit

操作步驟:
1:樣品準備:取1毫升細胞培養(yǎng)上清(貼壁和懸浮細胞都可以 已培養(yǎng)48小時以上),在16000g離心5分鐘,小心棄去上清,避免丟失沉淀(沉淀量有可能很少,目視看不到)。將沉淀用無菌PBS重懸,在16000g離心5分鐘,同樣小心棄去上清,如此反復用無菌PBS洗三次 將獲得的沉淀用100微升超純水重懸,置于100℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存1到2個月。
2:PCR反應的準備:
待各組份融化后先瞬時離心,然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應體系,每次實驗需加一個陰性和一個陽性對照,測試反應管可以有多個。配制過程中應注意無菌,并注意避免操作產生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染,推薦在有風壓的設備如超凈臺或生物安全柜中進行操作。建議配制完畢后瞬時離心以使液體沉至管底。

產品相關關鍵字: 草魚呼腸孤病毒3型 LAMP試劑盒
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