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產(chǎn)品展示
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牛輪狀病毒組RT-LAMP試劑盒圖片
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產(chǎn)品型號(hào):
50T
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
牛輪狀病毒組RT-LAMP試劑盒圖片建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織,若為長(zhǎng)期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
  50T牛輪狀病毒組RT-LAMP試劑盒圖片的詳細(xì)資料:

服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

牛輪狀病毒組RT-LAMP試劑盒圖片

RT-LAMP kit for bovine rotavirus

BJ-P987612

它具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增鮑皰疹樣病毒,與其他植物沒(méi)有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
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使用及效果:
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

5g蟬花1-9Human PLSCR1(Phospholipid scramblase 1) ELISA Kit

1g枯草芽胞桿菌Human GLT25D1(Procollagen galactosyltransferase 1) ELISA Kit

5g氧化微桿菌Human LDHD(Probable D-lactate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit

1g淤泥大洋芽孢桿菌Human GSTA3(Glutathione S-transferase A3) ELISA Kit

100g釀酒酵母Human IL26(Interleukin-26) ELISA Kit

500g毛木耳(紫木耳、黃背木耳)Human PVRL1(Poliovirus receptor-related protein 1) ELISA Kit

1g金針菇Human LCN12(Epididymal-specific lipocalin-12) ELISA Kit

5g穿孔素假單胞菌Human CPA3(Mast cell carboxypeptidase A) ELISA Kit

1g嗜淀粉乳桿菌Human OAS3(2′-5′-oligoadenylate synthase 3) ELISA Kit

5g枯草芽孢桿菌Human PDXP(Pyridoxal phosphate phosphatase) ELISA Kit

1g鏈格孢Human TTN(Titin) ELISA Kit

250mg鮑比氏鏈霉菌Human ANXA4(Annexin A4) ELISA Kit

50mg塔賓曲霉Human TNNT3(Troponin T, fast skeletal muscle) ELISA Kit

1g易變鏈霉菌Human RAB11A(Ras-related protein Rab-11A) ELISA Kit

25g產(chǎn)酸克雷伯氏菌Human RELB(Transcription factor RelB) ELISA Kit

5g唐菖蒲伯克霍爾德氏菌Human UCHL1(Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase isozyme L1) ELISA Kit

100g釀酒酵母Human PA2G4(ProlifeRation-associated protein 2G4) ELISA Kit

牛輪狀病毒組RT-LAMP試劑盒圖片CD10/CALLA  CD10抗體卡巴膽堿2-(2-乙基)二酸二乙酯Human TE (Telomerase) ELISA Kit

CD105/Endoglin  CD105抗體西洛他唑二(三環(huán)己基膦)亞芐基二氯化釕Human TFPI (Tissue Factor Pathway Inhibitor) ELISA Kit

CD117/c-kit/SCFR  干細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體/細(xì)胞表面分化抗原抗體氯唑沙宗二(三環(huán)己基膦)亞芐基二氯化釕Human TM (Thrombomodulin) ELISA Kit

phospho-c-kit (Tyr936)  磷酸化原癌基因c-kit抗體茴拉西坦6-(4-Acetamido-1,8-naphthalamido)hexanoic acidHuman C4 (Complement Component 4) ELISA Kit

Phospho-c-Kit (Tyr703)  磷酸化原癌基因c-kit抗體卡絡(luò)磺鈉2-氯-6-甲氧基吡啶Human FE (Ferritin) ELISA Kit

Phospho-c-Kit (Tyr719)  磷酸化原癌基因c-kit抗體奧美拉唑2-氯-6-甲氧基吡啶Human IgG (Immunoglobulin G) ELISA Kit

CD133 antigen  造血干細(xì)胞抗原CD133抗體維生素B22-氯-4-甲氧基吡啶Human TF (Serotransferrin) ELISA Kit

CD137/TNFRSF9   CD137抗體泛酸鈣2-氯-4-甲氧基吡啶Human FSTL1 (Follistatin Like Protein 1) ELISA Kit

操作步驟:
1:樣品準(zhǔn)備:取1毫升細(xì)胞培養(yǎng)上清(貼壁和懸浮細(xì)胞都可以 已培養(yǎng)48小時(shí)以上),在16000g離心5分鐘,小心棄去上清,避免丟失沉淀(沉淀量有可能很少,目視看不到)。將沉淀用無(wú)菌PBS重懸,在16000g離心5分鐘,同樣小心棄去上清,如此反復(fù)用無(wú)菌PBS洗三次 將獲得的沉淀用100微升超純水重懸,置于100℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存1到2個(gè)月。
2:PCR反應(yīng)的準(zhǔn)備:
待各組份融化后先瞬時(shí)離心,然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應(yīng)體系,每次實(shí)驗(yàn)需加一個(gè)陰性和一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照,測(cè)試反應(yīng)管可以有多個(gè)。配制過(guò)程中應(yīng)注意無(wú)菌,并注意避免操作產(chǎn)生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染,推薦在有風(fēng)壓的設(shè)備如超凈臺(tái)或生物安全柜中進(jìn)行操作。建議配制完畢后瞬時(shí)離心以使液體沉至管底。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 牛輪狀病毒組 LAMP試劑盒
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