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產(chǎn)品展示
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布尼亞維拉病毒RT-LAMP試劑盒說明書
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產(chǎn)品型號(hào):
50T
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
布尼亞維拉病毒RT-LAMP試劑盒說明書建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織,若為長(zhǎng)期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
  50T布尼亞維拉病毒RT-LAMP試劑盒說明書的詳細(xì)資料:

服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

布尼亞維拉病毒RT-LAMP試劑盒說明書

RT-LAMP kit for bunyavira virus

BJ-P987634

它具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增鮑皰疹樣病毒,與其他植物沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
?
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

100ml威氏芽孢桿菌Human DAO(D-amino-acid oxidase) ELISA Kit

100g豬丹毒絲菌Human TPRA1 (Transmembrane protein adipocyte-associated 1 homolog) ELISA KIT

25g枯草芽胞桿菌Human TMPPE (Transmembrane protein with metallophosphoesterase domain) ELISA KIT

500g希爾青霉Human IGFLR1 (IGF-like family receptor 1) ELISA KIT

1g畢赤酵母Human TRAF3IP3 (TRAF3-interacting JNK-activating modulator) ELISA KIT

1g蠟狀芽孢桿菌Human TBKBP1 (TANK-binding kinase 1-binding protein 1) ELISA KIT

250mg擬枝孢鐮孢Human TEFM (Transcription elongation factor, mitochondrial) ELISA KIT

5g污黑腐皮殼Human TP53RK (TP53-regulating kinase) ELISA KIT

1g黃硬皮馬勃Human TANK (TRAF family member-associated NF-kappa-B activator) ELISA KIT

50mg粘帚霉屬Human TSKS (Testis-specific serine kinase substrate) ELISA KIT

25g雙孢蘑菇Human TOPORS (E3 ubiquitin-protein ligase Topors) ELISA KIT

5g費(fèi)氏中華根瘤菌Human ADA(Adenosine deaminase) ELISA Kit

5MG匿名曲霉Human ELOVL1(Elongation of very long chain fatty acids protein 1) ELISA Kit

100g干草寒冷桿菌Human TBCK (TBC domain-containing protein kinase-like protein) ELISA KIT

25g豬丹毒絲菌Human TBKBP1 (TANK-binding kinase 1-binding protein 1) ELISA KIT

5g卵孢木霉Human PERP (p53 apoptosis effector related to PMP-22) ELISA KIT

0.5mg蠟狀芽孢桿菌Human TSKS (Testis-specific serine kinase substrate) ELISA KIT

布尼亞維拉病毒RT-LAMP試劑盒說明書Phospho-CEBP beta (Ser105)  磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體鹽酸雷莫司瓊             乙酰酮鉬Human AMA IgA (Anti-Myelin antibody IgA) ELISA Kit

Phospho-CEBP beta (Thr235)  磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體鹽酸二甲雙胍乙酰酮鉬Human MAG Ab (Anti-Myelin Associated Glycoprotein Antibody) ELISA Kit

CENPA  著絲粒蛋白A*度酸乙酰酮鉬Human FcγBP (Fc Fragment of IgG Binding Protein) ELISA Kit

Phospho-CENP-A (Ser7)  磷酸化著絲粒蛋白A格列美脲  3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,8-十三氟辛基烯酸酯Human FcγR3A (Fc Fragment of IgG Low Affinity IIIa Receptor) ELISA Kit

Cecropin  抗菌肽/天蠶素抗體格列美脲雜質(zhì)2 2-(三氟甲氧基)苯甲Human ANEA (Anti-Neutrophil Elastase Antibody) ELISA Kit

Cecropin  殺菌肽/天蠶抗菌肽抗體苯溴馬隆2-(三氟甲氧基)苯甲Human CYP1B1 (Cytochrome P450, family 1, subfamily B, polypeptide 1) ELISA Kit

HER2/C-erbB-2  HER2抗體美洛昔康2-(三氟甲氧基)苯甲Human FcεR II (Receptor II for the Fc Fragment of IgE) ELISA Kit

HER4/ErbB4  HER4抗體鹽酸二甲弗林1-溴-2-(二氟甲氧基)苯Human FETUA (Fetuin A) ELISA Kit

操作步驟:
1:樣品準(zhǔn)備:取1毫升細(xì)胞培養(yǎng)上清(貼壁和懸浮細(xì)胞都可以 已培養(yǎng)48小時(shí)以上),在16000g離心5分鐘,小心棄去上清,避免丟失沉淀(沉淀量有可能很少,目視看不到)。將沉淀用無菌PBS重懸,在16000g離心5分鐘,同樣小心棄去上清,如此反復(fù)用無菌PBS洗三次 將獲得的沉淀用100微升超純水重懸,置于100℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存1到2個(gè)月。
2:PCR反應(yīng)的準(zhǔn)備:
待各組份融化后先瞬時(shí)離心,然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應(yīng)體系,每次實(shí)驗(yàn)需加一個(gè)陰性和一個(gè)陽性對(duì)照,測(cè)試反應(yīng)管可以有多個(gè)。配制過程中應(yīng)注意無菌,并注意避免操作產(chǎn)生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染,推薦在有風(fēng)壓的設(shè)備如超凈臺(tái)或生物安全柜中進(jìn)行操作。建議配制完畢后瞬時(shí)離心以使液體沉至管底。

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 布尼亞維拉病毒 LAMP試劑盒
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