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產(chǎn)品展示
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絲狀網(wǎng)尾線蟲LAMP試劑盒說明書
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產(chǎn)品型號:
50T
產(chǎn)品報價:
產(chǎn)品特點:
絲狀網(wǎng)尾線蟲LAMP試劑盒說明書建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
  50T絲狀網(wǎng)尾線蟲LAMP試劑盒說明書的詳細資料:

服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

絲狀網(wǎng)尾線蟲LAMP試劑盒說明書

Lamp kit for reticulum filariae

BJ-P987790

它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增鮑皰疹樣病毒,與其他植物沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
?
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

500g橙色桿狀菌Human MUC15(Mucin-15) ELISA Kit

1g褐球固氮菌*Human SCCPDH ELISA Kit

25g埃切畢赤酵母Human SART1 ELISA Kit

5g球孢白僵菌Human SCEL ELISA Kit

1g多分枝靈芝Human SART3 ELISA Kit

250mg植物乳桿菌Human SAT2 ELISA Kit

25g美澳型核果褐腐病菌Human SAMM50 ELISA Kit

5g犁黑輪斑交鏈孢霉Human SASS6 ELISA Kit

1g季也蒙邁耶氏酵母Human A1BG(Alpha-1B-glycoprotein) ELISA Kit

5g空腸彎曲桿菌Human SATB1 ELISA Kit

100g宇佐美曲霉Human SATB2(Special AT-rich sequence-binding protein 2) ELISA Kit

25g貝氏葡萄座腔菌Human SBDS ELISA Kit

5g類產(chǎn)堿假單胞菌Human SAN1 ELISA Kit

1g釀酒酵母Human SCAP ELISA Kit

5g居海綿溶桿菌Human SAPS3 ELISA Kit

1g毛柄金錢菌(金針菇)Human SRGN(Serglycin) ELISA Kit

5g黃色刺孢鏈霉菌Human SARS2(Serine–tRNA ligase, mitochondrial ) ELISA Kit

絲狀網(wǎng)尾線蟲LAMP試劑盒說明書Mesothelioma  間質(zhì)細胞蛋白抗體利巴韋林1-金剛烷甲酰氯Human ETRB (Endothelin Receptor B) ELISA Kit

TORC1/CRTC1  環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體阿昔洛韋1-金剛烷甲酰氯Human GS (Gelsolin) ELISA Kit

Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151)  磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體鳥嘌呤N'N-二(4-磺丁基)-3,5-二胺二鹽(MADB)Human TM (Thrombin)ELISA Kit

MAP3K8/TPL2  絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體胱氨酸2-氨基腺嘌呤核苷Human TAT (Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit

Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Ser400)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體人胰島素2-氨基腺嘌呤核苷Human TSP1 (Thrombin Sensitive Protein 1) ELISA Kit

Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Thr290)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體重組胰島素單體-二聚體2--3-甲基吡啶Human TR (Thrombin Receptor) ELISA Kit

MATH1  腸道分化干細胞MATH-1蛋白抗體重組人生長激素2--3-甲基吡啶Human PT (Prothrombin) ELISA Kit

Morphine  單克隆抗體重組人生長激素單體-二聚體2--3-甲基吡啶Human F1+2 (Prothrombin Fragment 1+2) ELISA Kit

操作步驟:
1:樣品準(zhǔn)備:取1毫升細胞培養(yǎng)上清(貼壁和懸浮細胞都可以 已培養(yǎng)48小時以上),在16000g離心5分鐘,小心棄去上清,避免丟失沉淀(沉淀量有可能很少,目視看不到)。將沉淀用無菌PBS重懸,在16000g離心5分鐘,同樣小心棄去上清,如此反復(fù)用無菌PBS洗三次 將獲得的沉淀用100微升超純水重懸,置于100℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存1到2個月。
2:PCR反應(yīng)的準(zhǔn)備:
待各組份融化后先瞬時離心,然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應(yīng)體系,每次實驗需加一個陰性和一個陽性對照,測試反應(yīng)管可以有多個。配制過程中應(yīng)注意無菌,并注意避免操作產(chǎn)生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染,推薦在有風(fēng)壓的設(shè)備如超凈臺或生物安全柜中進行操作。建議配制完畢后瞬時離心以使液體沉至管底。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 絲狀網(wǎng)尾線蟲 LAMP試劑盒
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