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狂犬病病毒街毒株RT-LAMP試劑盒
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產品型號:
50T
產品報價:
產品特點:
狂犬病病毒街毒株RT-LAMP試劑盒建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,應盡量避免反復凍融,否則會導致模板的降解,影響PCR效率。
  50T狂犬病病毒街毒株RT-LAMP試劑盒的詳細資料:

服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據分析——結果交付——售后服務。

產品名稱

英文名稱

貨號

狂犬病病毒街毒株RT-LAMP試劑盒

RT-LAMP kit for rabies street strain

BJ-P988504

它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增鮑皰疹樣病毒,與其他植物沒有交叉反應。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
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使用及效果:
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

球毛殼Escherichia coli

蘆葦凸臍蠕孢Escherichia coli

淺金鏈霉菌Escherichia coli

彩色豆馬勃Escherichia coli

茶樹菇Escherichia coli

赤曲霉Escherichia coli

阿維菌素鏈霉菌*Escherichia coli

庫氏野野村氏菌Escherichia coli

白迷孔菌Escherichia coli

光滑青霉Escherichia coli

孟氏假單胞菌Escherichia coli

蘇云金芽孢桿菌加拿大亞種Escherichia coli

鴨疫里氏桿菌Escherichia coli

冷海水黃桿菌Escherichia coli

金龜子綠僵菌Escherichia coli

球形賴氨酸芽孢桿菌Escherichia coli

海洋海源菌Escherichia coli

狂犬病病毒街毒株RT-LAMP試劑盒叉頭蛋白F1抗體Monkey PUMA (P53 Upregulated Modulator of Apoptosis) ELISA Kit

高嗜酸性粒細胞綜合癥相關蛋白FIP1L1抗體Monkey Sp100 (Sp100 Nuclear Antigen) ELISA Kit

叉頭蛋白D4Monkey HSP-90 (Heat Shock Protein 90) ELISA Kit

磷酸化細絲蛋白A抗體Monkey ECFR (Eosinophil Chemotactic Factor Receptor) ELISA Kit

磷酸化細絲蛋白A抗體Monkey fT4 (Free Thyroxine) ELISA Kit

FMS樣酪氨酸激酶3配體抗體Monkey Bcl-10 (B-cell Leukemia/Lymphoma 10) ELISA Kit

F-box富含亮氨酸重復蛋白4抗體Monkey RANκ (Receptor Activator of  Nuclear Factor Kappa B) ELISA Kit

免疫球蛋白E受體Fc ε RIγ抗體Monkey ADCY4 (Adenylate Cyclase 4) ELISA Kit

操作步驟:
1:樣品準備:取1毫升細胞培養(yǎng)上清(貼壁和懸浮細胞都可以 已培養(yǎng)48小時以上),在16000g離心5分鐘,小心棄去上清,避免丟失沉淀(沉淀量有可能很少,目視看不到)。將沉淀用無菌PBS重懸,在16000g離心5分鐘,同樣小心棄去上清,如此反復用無菌PBS洗三次 將獲得的沉淀用100微升超純水重懸,置于100℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存1到2個月。
2:PCR反應的準備:
待各組份融化后先瞬時離心,然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應體系,每次實驗需加一個陰性和一個陽性對照,測試反應管可以有多個。配制過程中應注意無菌,并注意避免操作產生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染,推薦在有風壓的設備如超凈臺或生物安全柜中進行操作。建議配制完畢后瞬時離心以使液體沉至管底。

產品相關關鍵字: 狂犬病病毒街毒株 RT-LAMP試劑盒
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