PCR反應五要素：
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 
引物： 引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構，避免兩條引物間互補，特別是3’端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基，特別是zui末及倒數(shù)*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點，被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點，這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：禽傳染性支氣管炎病毒型RT-LAMP試劑盒圖片
英文名稱：RT-LAMP kit for avian infectious bronchitis virus
貨號：BJ-P987492
產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。?

產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
樣品要求及注意事項：
1、 如果提供實驗材料，實驗材料必須保證新鮮，請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑，并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ，也可以將樣品研磨后放在 Trigol中，動植物組織 ： 50～100mg/mlTrigol，貼壁細胞：10cm2/mlTrigol，懸浮細胞：5×106動植物，酵母細胞或細菌細胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細信息。
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
5g短小芽孢桿菌Human FBXW4(F-box and WD repeat domain containing 4) ELISA Kit

100gVagococcus sp.Human FBXO18 ELISA Kit

500g楊樹細盾霉Human FBXW5 ELISA Kit

1g假單胞菌Human FBXW7 ELISA Kit

5g竹蓀屬Human FBXO22 ELISA Kit

1g球孢白僵菌Human FCHSD1 ELISA Kit

5g松生擬層孔菌Human FCRLB ELISA Kit

100g香菇7Human FBXO28 ELISA Kit

25g簡青霉Human FMNL1 ELISA Kit

5g土生叢毛單胞菌Human FMR1NB ELISA Kit

1g暗產(chǎn)色鏈霉菌Human FKBP6 ELISA Kit

100ml扁菌Human FKBP3 ELISA Kit

25ml靈芝屬Human FKBP7 ELISA Kit

500ml里亞氏須腹菌Human FKBP2 ELISA Kit

1gPedobacterHuman FKBP9 ELISA Kit

25g大腸埃希氏菌Human FBXO3 ELISA Kit

5g美味側(cè)耳(紫孢側(cè)耳)Human FBXO41 ELISA Kit

禽傳染性支氣管炎病毒型RT-LAMP試劑盒圖片Agar test PH6.0 for the inhibitor test測試瓊脂PH6.0（抑制劑測試）人脈絡叢內(nèi)皮細胞總RNA3-溴-1-甲基吡咯DDB2(DNA damage-binding protein 2)  損傷DNA結(jié)合蛋白2抗原

Test test PH7.2 for the inhibitor test測試瓊脂PH7.2（抑制劑測試）人脈絡叢上皮細胞總RNA1,1-二甲基-2-苯基乙酸乙酯Defensin Beta1  防御素β1抗原

Test test PH8.0for the inhibitor test測試瓊脂PH8.0（抑制劑測試）人脈絡叢成纖維細胞總RNA1,1-二甲基-2-苯基乙酸乙酯Defensin Beta1(human)  防御素β1抗原(人)

Tetrathionate enrichment broth( base) acc.to MULLER-KAUFFMAN人腦膜細胞總RNA1,3-二甲氧基苯Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse)  防御素β2抗原（小鼠）

TGE agar Tryptone glucose extract agarTCE 瓊脂/胰蛋白胨葡萄糖瓊脂人神經(jīng)元總RNA1,3-二甲氧基苯Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(rat)  防御素β2抗原（大鼠）

THAYER-MARTIN agar base THAYER-MARTIN瓊脂基礎/奈瑟氏菌選擇培養(yǎng)基人小腦顆粒細胞總RNA1,3-二甲氧基苯DAPK1(Death associated protein kinase 1)  凋亡相關蛋白激酶1抗原

THAYER-MARTIN supplement1( VCT inhibitor combination)人海馬趾神經(jīng)細胞總RNA二溴異尿酸DHAV(duck hepatitis A virus)  鴨甲型肝炎A病毒抗原

THAYER-MARTIN添加劑1/奈瑟氏菌選擇培養(yǎng)添加劑1（抑制劑）人少突膠質(zhì)前體細胞總RNA二溴異尿酸Des(Desmin)  結(jié)蛋白抗原

注意事項:
1. 建議使用新鮮采取的動物組織，若為長期冷凍組織，應盡量避免反復凍融，否則會導致模板的降解，影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存，易產(chǎn)生沉淀。在使用前務必將其在室溫中放置一段時間，也可在37℃水浴中預熱10 min，以溶解沉淀，混勻后再使用。
3. 電泳檢測時，切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則，電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團拖尾亮帶，影響實驗結(jié)果。
4. 建議擴增片段長度1 kb以內(nèi)，以便擴增效率佳。
5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。