服務流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。 產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 | 2禽副粘病毒2型RT-LAMP試劑盒價格 | RT-LAMP kit for avian paramyxovirus type 2 | BJ-P987514 |
它具有下列特點: 1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。 2. 引物經過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增鮑皰疹樣病毒,與其他植物沒有交叉反應。 3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。 4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。 ? 使用及效果: PCR反應特點 (1) 特異性強 PCR反應的特異性決定因素為: ①引物與模板DNA特異正確的結合; ②堿基配對原則; ③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性; ④靶基因的特異性與保守性。 其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。 (2) 靈敏度高 PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。 (3) 簡便、快速 PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。 (4) 對標本的純度要求低 不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。 儲存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 PCR實驗方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。 3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 1g黑曲霉Human CD209 ELISA Kit 25g浸麻類芽孢桿菌Human Cathepsin H ELISA Kit 5g伯頓畢赤酵母Human CCDC158 (Coiled-coil domain-containing protein 158) ELISA Kit 1g解烷烴游動微菌Human CBP20 (NCBP 20 kDa subunit) ELISA Kit 5g盤長孢狀刺盤孢Human CCDC83 ELISA Kit 100gMicrovirga aerophila Human CCDC25 (Coiled-coil domain-containing protein 25) ELISA Kit 25g玫瑰綠色鏈霉菌Human CCKBR(Gastrin/cholecystokinin type B receptor) ELISA Kit 5g魔鬼弧菌Human CCNI2 ELISA Kit 1g溥硬皮馬勃Human CAMK2D(CaMKII delta) ELISA Kit 1g鉤狀木霉Human CaMKIV (Calcium/calmodulin-dependent protein kinase type IV) ELISA Kit 250mg大豆慢生根瘤菌Human CCNL1 ELISA Kit 25g多殺性巴氏桿菌Human CD209 ELISA Kit 5g粗柄羊肚菌Human Cathepsin H ELISA Kit 100g大腸埃希菌Human CBP20 (NCBP 20 kDa subunit) ELISA Kit 25g變灰鏈霉菌Human CCDC158 (Coiled-coil domain-containing protein 158) ELISA Kit 1g秀珍菇Human BTN3A1 (Butyrophilin Subfamily 3 Member A1) ELISA Kit 25g大腸埃希氏菌Human BBX(HMG box transcription factor BBX) ELISA Kit 2禽副粘病毒2型RT-LAMP試劑盒價格50110人肝內膽管上皮細胞微小RNA烷磺酸吡啶鹽HSP-105 (heat sock protein-105) 熱休克蛋白HSP105抗原 50120人肝細胞微小RNA烷磺酸吡啶鹽HtrA2/Omi peptide 絲氨酸蛋白酶/線粒體絲氨酸蛋白酶多肽抗原 50130人肝星形細胞微小RNA烷磺酸吡啶鹽IAA/BSA 吲哚-3-乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白 50140人心臟微血管內皮細胞微小RNA2-羥基-3-氟吡啶Iba-1(Ionized calcium bindingadaptor molecule-1) 離子鈣接頭蛋白抗原 50150人主動脈內皮細胞微小RNA2-羥基-3-氟吡啶IFABP(Intestinal Fatty acid binding protein) 小腸型脂肪酸結合蛋白抗原 50327人主動脈平滑肌細胞微小RNA2-羥基-3-氟吡啶IFITM1 (interferon induced transmembrane protein 1) 干擾素誘導跨膜蛋白1抗原 50290人心肌細胞微小RNA化鏑(III),超干 (REO)human IFN- Alpha (Interferon Alpha ) 干擾素-α抗原(人) 50300人心肌細胞-成人微小RNA3-氧代環(huán)丁基氨酸叔丁酯IFNGR1/CD119 peptide 干擾素-gamma受體1抗原 操作步驟: 1:樣品準備:取1毫升細胞培養(yǎng)上清(貼壁和懸浮細胞都可以 已培養(yǎng)48小時以上),在16000g離心5分鐘,小心棄去上清,避免丟失沉淀(沉淀量有可能很少,目視看不到)。將沉淀用無菌PBS重懸,在16000g離心5分鐘,同樣小心棄去上清,如此反復用無菌PBS洗三次 將獲得的沉淀用100微升超純水重懸,置于100℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存1到2個月。 2:PCR反應的準備: 待各組份融化后先瞬時離心,然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應體系,每次實驗需加一個陰性和一個陽性對照,測試反應管可以有多個。配制過程中應注意無菌,并注意避免操作產生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染,推薦在有風壓的設備如超凈臺或生物安全柜中進行操作。建議配制完畢后瞬時離心以使液體沉至管底。 |