操作步驟：
1：樣品準(zhǔn)備：取1毫升細(xì)胞培養(yǎng)上清（貼壁和懸浮細(xì)胞都可以 已培養(yǎng)48小時(shí)以上），在16000g離心5分鐘，小心棄去上清，避免丟失沉淀（沉淀量有可能很少，目視看不到）。將沉淀用無(wú)菌PBS重懸，在16000g離心5分鐘，同樣小心棄去上清，如此反復(fù)用無(wú)菌PBS洗三次 將獲得的沉淀用100微升超純水重懸，置于100℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存1到2個(gè)月。
2：PCR反應(yīng)的準(zhǔn)備：
待各組份融化后先瞬時(shí)離心，然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應(yīng)體系，每次實(shí)驗(yàn)需加一個(gè)陰性和一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照，測(cè)試反應(yīng)管可以有多個(gè)。配制過程中應(yīng)注意無(wú)菌，并注意避免操作產(chǎn)生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染，推薦在有風(fēng)壓的設(shè)備如超凈臺(tái)或生物安全柜中進(jìn)行操作。建議配制完畢后瞬時(shí)離心以使液體沉至管底。

服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

它具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增鮑皰疹樣病毒，與其他植物沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
?
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

費(fèi)氏中華根瘤菌Pseudomonas pseudoalcaligenes

HIV假病毒 YA194-5Pseudomonas pseudoalcaligenes

灰葡萄孢Pseudomonas pseudoalcaligenes

香菇Pseudomonas putida

副凝聚小短桿菌Pseudomonas putida

酮叢毛單胞菌Pseudomonas putida

稻平臍蠕孢Pseudomonas putida

艾丁湖喜鹽芽孢桿菌Pseudomonas putida

近似臘蘑Pseudomonas putida

枝狀枝孢Pseudomonas putida

球孢白僵菌Pseudomonas putida

多殺性巴氏桿菌Pseudomonas putida

乳酸乳球菌乳亞種Pseudomonas putida

大腸埃希菌Pseudomonas putida

三葉草根瘤菌Pseudomonas putida

弗雷德里克斯堡假單胞菌Pseudomonas putida

阿穆爾斯克灣鹽地桿菌Pseudomonas putida

白堊立克次氏體LAMP試劑盒磷酸化接頭蛋白Gab2抗體Monkey ANEA (Anti-Neutrophil Elastase Antibody) ELISA Kit

干擾素/維甲酸誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體Monkey UBR4 (Ubiquitin Protein Ligase E3 Component N-Recognin 4) ELISA Kit

磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體Monkey OLFM4 (Olfactomedin 4) ELISA Kit

多肽N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶13抗體Monkey PAP (Plasmin-Antiplasmin Complex) ELISA Kit

銜接蛋白γ/γ1-Adaptin抗體Monkey CTAPIII (Connective Tissue Activating Peptide III) ELISA Kit

半乳糖瓦爾登轉(zhuǎn)化酶抗體Monkey TFF2 (Trefoil Factor 2) ELISA Kit

半乳糖凝集素10抗體Monkey HCCS (Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit

半乳糖激酶2抗體Monkey FGFR4 (Fibroblast Growth Factor Receptor 4) ELISA Kit