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產(chǎn)品展示
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TNKS1/2抑制劑(AZ6102)
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產(chǎn)品報價:
產(chǎn)品特點:
TNKS1/2抑制劑(AZ6102)公司正在出售的產(chǎn)品:DDAH-II 雙甲基水解2抗體 規(guī)格: 0.2mlAdiponectin Receptor 1 脂聯(lián)素受體1抗體 0.2mlFast skeletal Myosin/MRLC2 骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體 規(guī)格: 0.1mlDDX4/MVH DDX4抗體 規(guī)格: 0.1mlFSTL5 卵泡抑素相關蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml
  TNKS1/2抑制劑(AZ6102)的詳細資料:

產(chǎn)品參數(shù):

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品貨號

TNKS1/2抑制劑(AZ6102)

AZ6102

1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

BJ-01X8380

商品詳細介紹:

AZ6102是有效的TNKS1/2抑制劑IC50值分別為3nM和1nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

:1645286-75-4

分子量:428.53

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作步驟

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
2.png

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點:

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

小鼠 CNDP2 / CPGL 基因全長ORF克隆大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)免疫試劑盒*直銷

小鼠 IL10 基因全長ORF克隆大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(AMH)免疫試劑盒進口、組裝

小鼠 GPX-3 基因全長ORF克隆大鼠免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒進口、分裝

小鼠 AADAC 基因全長ORF克隆大鼠免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

小鼠 TGFA 基因全長ORF克隆大鼠免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒*直銷

小鼠 SDF2 基因全長ORF克隆大鼠免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒進口、組裝

小鼠 BDNF 基因全長ORF克隆大鼠絡(TYR)免疫試劑盒進口、分裝

小鼠 CystatinC / CST3 基因全長ORF克隆大鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

小鼠 TGFBR1 基因全長ORF克隆大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)免疫試劑盒*直銷

小鼠 F11 / FXI 基因全長ORF克隆大鼠卵泡抑素(FS)免疫試劑盒進口、組裝

小鼠 CST7 基因全長ORF克隆大鼠?;D(zhuǎn)移(LCAT)免疫試劑盒進口、分裝

TNKS1/2抑制劑(AZ6102)200 mL 大鼠白細胞分離液1.084 Cell Separation Solution -20℃保存

100mL GTE Buffer,pH8.0   GTE Buffer,pH8.0   常溫保存

1.5mL DMSO,PCR級 DMSO,PCR Grade 常溫

2 ug pLenti4/TO/V5-DEST pLenti4/TO/V5-DEST 低溫運輸,-20℃保存

KF鏈球菌肉湯 KF Streptococcus Broth 100g

1瓶 NEC細胞株 NEC 低溫運輸和保存

Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒 Kovacs's indole Box 5ml*2

5g 腺苷 Adenosine 4℃保存

100mL TEA Buffer,0.2M,pH7.4  TEA Buffer,0.2M,pH7.4  常溫保存

100µL 小鼠抗mCherry標簽單抗 Anti mCherry-Tag Mouse MAb -20℃保存

2 ug PT/neo PT/neo 低溫運輸,-20℃保存

 


產(chǎn)品相關關鍵字: TNKS1/2 抑制劑
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