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產(chǎn)品展示
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腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒
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產(chǎn)品型號:
50T
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
家蠶卵黃蛋白(LT) ELISA試劑盒,家蠶卵黃蛋白(LT) ELISA試劑盒價(jià)格,家蠶卵黃蛋白(LT) ELISA試劑盒說明書,請咨詢本公司人員.
  50T腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒的詳細(xì)資料:

儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品名稱

腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒

英文名稱 Adenovirus(AV)
貨號 BJ-R6349

產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記:
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

裂解Ⅸ 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:真菌/酵母細(xì)胞*裂解

細(xì)胞SPHK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

冰凍切片平滑肌組織染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次

蛋白酶/酶*抑制混合 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:抑制蛋白破壞性生物酶活性

通用型DNA平滑末端連接克隆*試劑盒(包括內(nèi)切酶) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次

CDK3(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:100微克

細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-13)活性熒光定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次(10樣本)

細(xì)胞SRCN1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

10倍PB濃縮緩沖溶 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升

特級蛋白酶K溶(5毫克/毫升) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:1毫升

組織膠原蛋白(collagen)比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

細(xì)胞β-內(nèi)酶報(bào)告基因活性生物發(fā)光法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒氨基 鑒別 進(jìn)口/國產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 50mg

水楊酸 含量測定 進(jìn)口/國產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 50mg

α-基 檢查用 進(jìn)口/國產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 50mg

酚妥拉明 檢查用 進(jìn)口/國產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 1mg

萘唑林 含量測定 進(jìn)口/國產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 50mg

氨砜 檢查用 進(jìn)口/國產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 50mg

阿替洛爾   含量測定 進(jìn)口/國產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格:  1mg 

倍他米松 含量測定 進(jìn)口/國產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 50mg

倍氯米松 含量測定 進(jìn)口/國產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 1mg

茶海明 含量測定 進(jìn)口/國產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 1mg

醋酸地塞米松 含量測定 進(jìn)口/國產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 1mg

醋酸可的松 含量測定 進(jìn)口/國產(chǎn) 常溫,避光 規(guī)格: 50mg

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 腺病毒D型 探針法 熒光定量PCR試劑盒
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