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姬姆薩染液(10×)
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產(chǎn)品特點(diǎn):
姬姆薩染液(10×)公司正在出售的產(chǎn)品:10×0.1mL 凝膠法內(nèi)毒素半定量試劑盒 Gel Based TAL Kit 4℃保存2 ug pET-40b(+) pET-40b(+) 低溫運(yùn)輸,-20℃保存尿素生化管(軍團(tuán)菌) 20支1瓶 A3細(xì)胞株 A3 低溫運(yùn)輸和保存1個(gè) 雜交管(35×100mm) Hybridization Tube 常溫
  姬姆薩染液(10×)的詳細(xì)資料:

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

中文名稱(chēng):姬姆薩染液(10×)

英文名稱(chēng):

產(chǎn)品規(guī)格:25ml

產(chǎn)品貨號(hào):BJ-01X6599

姬姆薩染料為天青色素、次甲藍(lán)的混合物,本染色液適于血液涂抹標(biāo)本、血球、瘧原蟲(chóng)、立克次體以及骨髓細(xì)胞、脊髓細(xì)胞等的染色。

染前用蛋白酶等進(jìn)行處理,然后再用姬姆薩染液染色,在染色體上,可以出現(xiàn)不同濃淡的橫紋樣著色。姬姆薩染液可將細(xì)胞核染成紫紅色或藍(lán)紫色,胞漿染成粉紅色,在光鏡下呈現(xiàn)出清晰的細(xì)胞及染色體圖像。

試劑盒組份:

10×姬姆薩染色原液 25mL

10×姬姆薩稀釋液 25mL

染色步驟1.根據(jù)需要量,取8ml 雙蒸水,加入姬姆薩原液1ml,再加入姬姆薩稀釋液1ml,混勻即為工作液,此工作液常溫可保存兩周(如果無(wú)法短期用完,請(qǐng)確保姬姆薩原液不要見(jiàn)到水或者其他緩沖液)。2.按常規(guī)方法制備血涂片,待血膜干后,用甲醇固定2~3 分鐘;3.將血涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加2~3 滴染色工作液,使覆蓋全部血膜(具體用量視樣品大小而定),室溫染色15~30 分鐘。4.用自來(lái)水緩慢從玻片一端沖洗(注意勿先倒去染液或直接對(duì)血膜沖洗),涼干后鏡檢。

四、注意事項(xiàng)1.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。2.如果染色過(guò)濃或者過(guò)淡,請(qǐng)調(diào)整姬姆薩原液加入量(姬姆薩原液常用的稀釋比例是10 倍,但有時(shí)候可能會(huì)稀釋5 倍或者15 倍)。3.姬姆薩原液采用常規(guī)方法配制(姬姆色素:甘油:甲醇=1:66:66),請(qǐng)?jiān)谑褂脮r(shí)小心不要接觸到水。否則時(shí)間長(zhǎng)了會(huì)失效。

儲(chǔ)存:2~8℃,避光,有效期12個(gè)月。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。


QQ截圖20220509112004.png

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

Influenza Virus A N3(AIV-N3)甲型流感()病毒N3亞型RT-PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用) 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周

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Semen arecae檳榔PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周

Mycobacterium asiaticum亞洲分枝桿探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

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Theileria parva小泰勒蟲(chóng)LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

狼源性成分LAMP試劑盒 種源性檢測(cè)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

小鼠源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒 種源性檢測(cè)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Lelystad Virus(LV)染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Avian Paramyxovirus (APMV)禽副粘病毒通用探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒(暫停) 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒E亞群探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

Propionibacterium acnes痤瘡丙酸桿LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周

姬姆薩染液(10×)沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):Sabouraud’s Glucose Broth Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

衛(wèi)矛醇半固體 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:20支

Na+/H+交換體3(NHE3)免疫試劑盒*直銷(xiāo)

豬鈣/鈣調(diào)素依賴(lài)性蛋白激2β(CAMK2B/CAM2/CAMKB)免疫試劑盒*直銷(xiāo)

牛總蛋白S(TPS)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

小鼠VIIIa輕鏈(F8aLC)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

雞免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒*直銷(xiāo)

小鼠γ干擾素(IFN-γ)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大鼠新喋呤免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

兔脂蛋白α(Lp-α)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

 


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