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產(chǎn)品展示
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ATX(autotaxin)抑制劑(HA130)
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產(chǎn)品型號:
產(chǎn)品報價:
產(chǎn)品特點(diǎn):
ATX(autotaxin)抑制劑(HA130)公司正在出售的產(chǎn)品:Bestrophin 2 卵黃狀黃斑蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlJNK2 氨基末端激2抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-MEK1/MAP2K1(Ser385) 磷酸化絲裂原活化蛋白激1抗體 規(guī)格: 0.1mlGLI1/Zfp5 腦膠質(zhì)瘤相關(guān)蛋白抗體(鋅指蛋白5) 0.1mlPhospho-ATRIP (Ser22
  ATX(autotaxin)抑制劑(HA130)的詳細(xì)資料:

產(chǎn)品參數(shù):

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品貨號

ATX(autotaxin)抑制劑(HA130)

HA130

1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

BJ-01X8192

商品詳細(xì)介紹:

HA130是一種選擇性的ATX(autotaxin)抑制劑,IC50為28nM。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

:1229652-21-4

別名:HA-130

純度:98.09%

分子量:463.29

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

實(shí)驗(yàn)報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作步驟

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
2.png

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn):

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。

5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

CDH13 基因全長ORF克隆人蛋白1調(diào)控/抑制因子亞基1A(PPP1R1A)免疫試劑盒*直銷

RGS17 基因全長ORF克隆人蛋白酪自身抗體免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

NAT2 基因全長ORF克隆人蛋白酪1B(PTP1B)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

STX6 基因全長ORF克隆人蛋白聚糖4(PRG4)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

Carboxypeptidase M 基因全長ORF克隆人蛋白精脫亞氨4(PADI4)免疫試劑盒*直銷

CHI3L1 / YKL40 基因全長ORF克隆人蛋白精甲基轉(zhuǎn)移1(PRMT1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

OSMR / IL-31RB 基因全長ORF克隆人蛋白激C(PKC)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

AGO1 基因全長ORF克隆人蛋白激C beta II(PKC-bII)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

DNMT2 / TRDMT1 基因全長ORF克隆人蛋白激B(PKB)免疫試劑盒*直銷

Chitotriosidase / Chitinase 1 / CHIT1 基因全長ORF克隆人蛋白基因產(chǎn)物9.5(PGP 9.5)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

NTMT1 基因全長ORF克隆人蛋白二硫化物異構(gòu)A3(PDIA3)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

ATX(autotaxin)抑制劑(HA130)Western Blotting DAB顯色法檢測試劑盒(藍(lán)色)(小鼠IgG)  1盒  DAB chromogenic reagent kit For Western Blotting50次 凝膠法miRNA分離試劑盒   

Western Blotting DAB顯色法檢測試劑盒(藍(lán)色)(兔IgG)  1盒  DAB chromogenic reagent kit For Western Blotting(with)2 ug pPyCAGIP pPyCAGIP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

ECM Kit(山羊IgG)  1盒  馬尿酸鈉培養(yǎng)基  250g

ECM Kit(小鼠IgM)  1盒  5mg 抑制劑 Pepstatin A 4℃保存

ECM Kit(大鼠IgG)  1盒  50T 人免疫缺陷病毒PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

ECM Kit(兔IgG)  1盒  5 mg Carboxy-PTIO (一氧化氮清除劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

DAB顯色試劑盒×40(棕黃色)(WB專用)  1盒  250mL Citrate Buffer(檸檬酸鹽緩沖液),0.5M,pH4.0   Citrate Buffer,0.5M,pH4.0   常溫保存

DAB顯色試劑盒(紫藍(lán)色)(WB專用)  1盒  1袋 顯影粉 Developing Solution,Powder 室溫避光保存

蛋白印跡膜再生液  100ml  2 ug phRL-TK phRL-TK 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

增強(qiáng)型蛋白印跡膜再生液  100ml  溶血瓊脂基礎(chǔ)  250g

X光片背景去除液試劑盒  1盒  2 ug pGCsi/H1/Neo GFP-NON pGCsi/H1/Neo GFP-NON 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

 


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