操作步驟: 實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。 產(chǎn)品名稱 | 肝脂酶測試盒100管/48樣 | 規(guī)格 | 100管/48樣 | 檢測方法 | 微量法 | 貨號 | BJ-01S9834 |
商品介紹: 測定意義: 肝酯酶是脂肪分解酶,在肝實質(zhì)細胞中合成,存在于肝臟竇周間隙內(nèi)皮細胞表面和竇周間隙腔面的肝細胞微絨毛表面,可促進脂蛋白中的向類固醇激素轉(zhuǎn)化,血漿中的HL活性增高時,血漿中小顆??蓪е翷DL水平升高,加速動脈粥樣硬化的發(fā)生。 測定原理 肝酯酶水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生α-萘酚,可與固藍B鹽形成紫紅色偶氮化合物,在595nm有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內(nèi)與肝酯酶活性成正相關(guān)。 自備實驗用品及儀器 天平、冷凍離心機、研缽、水浴鍋、可見分光光度計、微量石英比色皿。 |
測定步驟: 1、 酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點: ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。 Hypoderma bovis牛皮蠅蛆探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 Mycobacterium africanum非洲分枝桿LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 Influenza Virus A甲型流感()病毒N2亞型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 鴨源性成分LAMP試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 Cryptosporidium serpentis蛇形隱孢子蟲PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負20度 一年 2-4周 Human Polyomavirus 7(HPyV7) 人多瘤病毒7 染料法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 Peronosclerospora spp.玉米霜霉病PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 Nocardia spp.諾卡通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 Neospora spp.新孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 Human Coronavirus(HCoV-HKU)人HKU RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 Rhizoma polygonati黃精探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周 Rhizopus cohnii科恩酒曲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周 肝脂酶測試盒100管/48樣細胞甘肽S轉(zhuǎn)移(GSH ST)總活性動力比色法定量檢測試劑盒 20次 真/酵母細胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒 20次 細胞COT激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次 通用包涵體蛋白溶解試劑盒 10次 石蠟切片組織CDK3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒 10/20次 細凍存培養(yǎng)基 100毫升 細胞P35蛋白表達熒光定量檢測試劑盒 10/50 次 真/酵母細胞可溶性膜蛋白相位分離制備試劑盒 20次 糖類總量氨基苯硫熒光定量檢測試劑盒 20次 (包括抗體) 噬體稀釋緩沖液 500毫升 |